双光子共聚焦成像系统
激光:
1、单光子模式:固体激光器4个,激光波长分别为405nm、488nm、561nm、640nm;
2、双光子模式:飞秒脉冲激光器,近红外波段可调节(最小10nm跨度):700 nm - 1040 nm
适合样本:
1、二次谐波(SHG)成像
2、厚样本、深层层析成像(200-500μm)
3、活体动态成像
4、支持时间序列(mv视频)、Z层扫、拼大图等
特点:
1、激光只在焦点处,点聚集性成像,约波长3次方体积范围,焦面外的杂散光很少(分辨率高)
2、近红外光,基本没有生物自发荧光背景干扰,在组织中的散射系数较小,穿透力较深。
3、无针孔,荧光收集率的提高从而提高了图像对比度(针孔会滤掉非焦面的光和大部分焦面光)
上述双光子特点,可带来双光子优势如下:
1)对样本光漂白区域小、光毒性小,可活体成像
2)信噪比高
3)穿透更深,适合厚样本,比如在活体脑组织中有效成像深度通常可达200-500μm、甚至1 mm。